HRP的简介
看我优雅身姿
HRP三维结构
HRP中含有血红素,能利用H2O2氧化许多有机及无机化合物,被发现广泛分布于植物界,其中辣根(辣根是一种常年生香草,在世界大部分温和地区都有种植)中含量非常高,故名辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)。HRP是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以常用于生物及医学领域。
HRP由多个同工酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的纯度。高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。
根据RZ值,有以下这些用途:
1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要应用于免疫学,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B .
2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要应用于临床化学,我们的客户也有将这个规格的产品应用于免疫学研究的。此时,一个标准化的分析方法就变得尤为重要。
3) RZ>1 活性 >100u/mg,主要应用于血糖试纸和尿液分析试纸。
4) RZ>0.6 活性 >60u/mg ,主要应用于尿液分析试纸。
免疫学中的应用
看我矫捷步伐
HRP的抗体标记示意图
HRP(辣根过氧化物酶)可催化ECL等化学发光试剂产生化学反应发光,或催化DAB,TMB等底物显色。HRP标记可以直接用于免疫学实验,省却中间二抗步骤;在双加心ELISA中也应用最为广泛。
HRP的抗体标记示意图
(1)发光过程:在化学发光酶免疫分析(CLEIA)中,使用过氧化物酶标记抗体,进行免疫反应后,利用鲁米诺作为发光底物,在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH和H2O2 )作用下鲁米诺发光,酶免疫反应物中酶的浓度决定了化学发光的强度。
(2)常用底物:鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,luminol),或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼),是一类重要的发光试剂。
(3)发光条件:鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行, 在过氧化物酶及活性氧[过氧化阴离子,单线态氧,羟自由基,过氧化氢]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光,其波长为425nm。
(4)研究发展:
传统的化学发光体系(HRP- H2O2 -LUMINOL)为几秒内瞬时闪光,存在发光强度低、不易测量等缺点。
后来,在发光系统中加入增强发光剂,以增强发光信号,并在较长的时间内保持稳定,便于重复测量,从而提高分析灵敏度和准确性。
产品推荐
博奥龙的HRP标记试剂盒采用改良的碘氧化法活化辣根过氧化物酶(HRP),经过氧化以后活化的HRP可以与待标记物的游离氨基结合,发生希夫碱反应(Schiff's Base Reaction)。本品适用于带有游离氨基的物质的标记,比如:带有游离氨基(伯胺)的小分子化合物,蛋白或抗体。
有效期12个月(HRP有效期12个月)
其他相关产品:
货号 |
产品名称 |
BF06093 |
生物素标记试剂盒 |
BF06093S |
超级生物素快速标记试剂盒 |
BF06094 |
FITC快速标记试剂盒 |
BF06095 |
HRP标记试剂盒 |
BF06147 |
醛基活化的辣根过氧化物酶(HRP) |
BF06149 |
NHS-生物素 |
博奥龙公司简介
博奥龙是一家由留学归国人员创办的生命科学领域高新技术企业,专业从事新型生化试剂的研发和销售。公司理念是通过自主创新的品牌产品改变传统实验模式,使生命科学研究变得更轻松、更高效。公司成立八年多来推出了上万种自主品牌产品,其中包括QuickAntibody™免疫佐剂、QuickShuttle™转染试剂、QuickFreezing™细胞冻存液、QuickVerification™胶体金检测卡、Hybridoma Feeder添加因子和Pan-HPV™ HPV L1抗体等多种独特的自主知识产权产品。秉承“专业、创新”的理念,公司将继续在擅长专业领域做强做大,为客户提供更多的创新产品和服务,力争成为国际知名的品牌生化试剂公司。
公司主要产品有抗体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗体、近300种病理级抗体、近3000余种病毒蛋白及病毒抗体,另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。我司为博奥龙广东总代理,欢迎新老朋友交流合作。