产品基本信息
- KX0110050
- BioShuttle siRNA/miRNA体内转染
- 转染试剂
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产品详情
运输保存：常温运输，4℃保存，稳定保存期12个月。长期保存置于-20℃；
产品描述
BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)是一种新型高效阳离子聚合物，可与RNA (包括siRNA、miRNA、重组RNA)相互作用形成纳米复合物，从而用于RNA的体内递送。BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)具有递送效率高，安全性好等特点。BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)通过内吞作用进入细胞后，表达“质子海绵效应”的特性，缓冲内体pH值，保护RNA不被降解，连续的质子内流也可引起核内体渗透肿胀和破裂，为RNA逃逸到细胞质提供了机制。
产品特色
n 递送效率高
n 安全性好
操作步骤
（1）试剂要求
为了形成大小均一且形态稳定的BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)/RNA纳米复合物，推荐使用5%无菌无酶等渗葡萄糖溶液（提供10%无菌无酶葡萄糖溶液，体内注射时终浓度稀释至5%）；
如果稀释RNA的溶液含盐量高可能导致与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)形成复合物时产生沉淀；
RNA使用PAGE或HPLC进行纯化。
（2）推荐RNA量及注射量
根据动物模型、给药途径、作用靶器官确定RNA使用量，表1给出了在啮齿动物中RNA转染的推荐配比剂量。
最终注射液RNA浓度不超过0.5 μg/μL以免产生沉淀
RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的推荐使用比例为质量体积比1:1 (w/v，1 μg RNA: 1 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))。
表1. 啮齿动物中RNA转染的推荐配比剂量
注：对于其他动物以及不同注射方式的体内转染配比剂量，可联系技术支持。
（3）使用说明
a. 用10%葡萄糖溶液稀释RNA储备液（通常RNA储备液用无菌DEPC水配制），混匀。稀释后的RNA溶液体积为最终所需注射体积的1/2，葡萄糖溶液终浓度为5%。
b. 用10%葡萄糖溶液稀释BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)。所需BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)体积按照转染试剂与RNA体积质量比1:1计算。转染试剂稀释后体积为最终注射体积的1/2，葡萄糖溶液终浓度为5%，混匀；
c. 将稀释好的BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)加入稀释好的RNA中，轻轻混匀；
d. 室温孵育15分钟，此时所形成的复合物可在室温下稳定存放2小时；
e. 在适当的时间（如，注射后6-96小时）监测基因表达，具体时间取决于注射方式和目标器官。
f. 以小鼠静脉注射途径给药为例说明复合物配制方式。如，实验注射剂量为25 μg RNA/只小鼠，RNA储备液浓度为1 μg/μL；注射体积为100 μL/只小鼠；RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的推荐使用比例为质量体积比1:1 (w/v，1 μg RNA: 1 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))。因此，单只小鼠需配制如下溶液：
i. RNA工作液，用的10%葡萄糖溶液稀释RNA储备液；吸取25 μL RNA储备液，加入25 μL的10%葡糖糖溶液，混匀；
ii. BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液，用10%葡萄糖溶液稀释BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)；吸取25 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)，加入25 μL的10%葡糖糖溶液，混匀。RNA及BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液配制好后，将BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液加入RNA工作液中，轻轻混匀；室温孵育15分钟后，通过尾静脉进行注射。
其余给药方式的配制过程与本例相同（表2）
表2. 体内RNA转染的配比剂量举例
注：RNA储备液浓度为1 μg/μL
注意事项
（1） 使用高纯度的RNA是转染成功的关键因素，在转染前确定RNA的含量和纯度（OD260/280＞1.8），实验过程中使用DEPC处理过的耗材和试剂，避免RNase污染；另外RNA制备时盐含量高会导致复合物形成时产生沉淀，因此应将RNA重悬于5%葡萄糖溶液（由DEPC水配制）或DEPC水中；
（2） 体内转染所用RNA以及稀释液均为无菌制品，且操作步骤全程无菌；
（3） 体内转染时按需现配现用；
（4） 为了达到更好的转染效果，可根据实验需要优化RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的配比，推荐优化比例范围为1:1~1:4 (w/v, RNA: BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))；
（5） 本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断和治疗。
| 试剂盒组分 | 规格 | 保存 |
| BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo) | 0.8ml | 4℃保存 |
| 10%葡萄糖溶液（DEPC水配置） | 4ml | 4℃保存 |
产品描述
BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)是一种新型高效阳离子聚合物，可与RNA (包括siRNA、miRNA、重组RNA)相互作用形成纳米复合物，从而用于RNA的体内递送。BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)具有递送效率高，安全性好等特点。BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)通过内吞作用进入细胞后，表达“质子海绵效应”的特性，缓冲内体pH值，保护RNA不被降解，连续的质子内流也可引起核内体渗透肿胀和破裂，为RNA逃逸到细胞质提供了机制。
产品特色
n 递送效率高
n 安全性好
操作步骤
（1）试剂要求
为了形成大小均一且形态稳定的BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)/RNA纳米复合物，推荐使用5%无菌无酶等渗葡萄糖溶液（提供10%无菌无酶葡萄糖溶液，体内注射时终浓度稀释至5%）；
如果稀释RNA的溶液含盐量高可能导致与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)形成复合物时产生沉淀；
RNA使用PAGE或HPLC进行纯化。
（2）推荐RNA量及注射量
根据动物模型、给药途径、作用靶器官确定RNA使用量，表1给出了在啮齿动物中RNA转染的推荐配比剂量。
最终注射液RNA浓度不超过0.5 μg/μL以免产生沉淀
RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的推荐使用比例为质量体积比1:1 (w/v，1 μg RNA: 1 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))。
表1. 啮齿动物中RNA转染的推荐配比剂量
| 动物 | 注射方法 | 复合物配方 | RNA最优范围 | 注射体积最优范围 |
| 小鼠 | 静脉注射 | 20 μgRNA+20 μL转染试剂+葡萄糖溶液至100 μL (葡萄糖溶液终浓度为5%) | 20-60 μg (1-3mg/kg) | 100-300 μL |
| 腹腔内注射 | 100 μgRNA+100 μL转染试剂+葡萄糖溶液至0.4 mL (葡萄糖溶液终浓度为5%) | 100-200 μg (4-8mg/kg) | < 1 mL | |
| 皮下注射 | 5 μg RNA+5 μL转染试剂+葡萄糖溶液至10 μL (葡萄糖溶液终浓度为5%) | 3-5 μg | 5-15 μL | |
| 原位注射 | 5 μg RNA+5 μL转染试剂+葡萄糖溶液至10 μL (葡萄糖溶液终浓度为5%) | 5-10 μg (0.25-0.5mg/kg) | 10-20 μL |
（3）使用说明
a. 用10%葡萄糖溶液稀释RNA储备液（通常RNA储备液用无菌DEPC水配制），混匀。稀释后的RNA溶液体积为最终所需注射体积的1/2，葡萄糖溶液终浓度为5%。
b. 用10%葡萄糖溶液稀释BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)。所需BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)体积按照转染试剂与RNA体积质量比1:1计算。转染试剂稀释后体积为最终注射体积的1/2，葡萄糖溶液终浓度为5%，混匀；
c. 将稀释好的BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)加入稀释好的RNA中，轻轻混匀；
d. 室温孵育15分钟，此时所形成的复合物可在室温下稳定存放2小时；
e. 在适当的时间（如，注射后6-96小时）监测基因表达，具体时间取决于注射方式和目标器官。
f. 以小鼠静脉注射途径给药为例说明复合物配制方式。如，实验注射剂量为25 μg RNA/只小鼠，RNA储备液浓度为1 μg/μL；注射体积为100 μL/只小鼠；RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的推荐使用比例为质量体积比1:1 (w/v，1 μg RNA: 1 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))。因此，单只小鼠需配制如下溶液：
i. RNA工作液，用的10%葡萄糖溶液稀释RNA储备液；吸取25 μL RNA储备液，加入25 μL的10%葡糖糖溶液，混匀；
ii. BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液，用10%葡萄糖溶液稀释BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)；吸取25 μL BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)，加入25 μL的10%葡糖糖溶液，混匀。RNA及BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液配制好后，将BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)工作液加入RNA工作液中，轻轻混匀；室温孵育15分钟后，通过尾静脉进行注射。
其余给药方式的配制过程与本例相同（表2）
表2. 体内RNA转染的配比剂量举例
| 注射方法 （注射量） | 注射体积 | RNA储备液 （1 μg/μL） | 稀释RNA储备液的10%葡萄糖 溶液 | BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo) | 稀释BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的10%葡萄糖溶液体积 |
| 静脉注射 （25 μg RNA/只） | 100 μL | 25 μL | 25 μL | 25 μL | 25 μL |
| 腹腔内注射 （50 μg RNA/只） | 200 μL | 50 μL | 50 μL | 50 μL | 50 μL |
| 皮下注射 （5 μg RNA/只） | 20 μL | 5 μL | 5 μL | 5 μL | 5 μL |
| 原位注射 （10 μg RNA/只） | 40 μL | 10 μL | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
注：RNA储备液浓度为1 μg/μL
注意事项
（1） 使用高纯度的RNA是转染成功的关键因素，在转染前确定RNA的含量和纯度（OD260/280＞1.8），实验过程中使用DEPC处理过的耗材和试剂，避免RNase污染；另外RNA制备时盐含量高会导致复合物形成时产生沉淀，因此应将RNA重悬于5%葡萄糖溶液（由DEPC水配制）或DEPC水中；
（2） 体内转染所用RNA以及稀释液均为无菌制品，且操作步骤全程无菌；
（3） 体内转染时按需现配现用；
（4） 为了达到更好的转染效果，可根据实验需要优化RNA与BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo)的配比，推荐优化比例范围为1:1~1:4 (w/v, RNA: BioShuttle siRNA/miRNA体内转染试剂(in vivo))；
（5） 本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断和治疗。
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