多重荧光免疫组化技术
多重荧光免疫组化技术(mHC)可以进行肿瘤免疫微环境全景分析,在一张组织切片上对多个生物标志物进行标记,定量评估细胞的表型,全面了解细胞间复杂的相互关系,全景刻画肿瘤免疫微环境以及细胞间的原位空间信息。
多重荧光免疫组化技术(mIHC)的工作原理
多重荧光免疫组化技术 (Multiplex immunohistochemical,mlHC)也称作酪氨酸信号放大(Tyramide dignalamplification,TSA)技术,是一类利用辣根过氧化酶 (HorseradishPeroxidase,HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。TSA(Tyramide signal amplification)技术同样采用HRP标记的二抗,HRP催化加入体系的荧光素底物,生成活化荧光底物,活化底物可与抗原上的酪氨酸共价结合,使样品上稳定地共价结合荧光素。之后用热修复洗去非共价结合的抗体,再换下一种一抗来第二轮孵育,换另一种荧光素底物,如此往复就可实现多重标记。